一、枇杷种质资源的离体保存研究Ⅱ生长抑制剂的影响（论文文献综述）
沈光[1]（2021）在《橡胶草高效繁育、栽培技术与管理优化研究》文中研究指明橡胶草（Taraxacum kok-saghyz Rodin）是菊科蒲公英属多年生草本植物,其根中含有2.89～27.89%的天然橡胶和25～40%的菊糖,还可作为模式植物研究天然橡胶合成机制,具有重要经济和科研价值。由于其良好的商业化前景,美国、欧洲和中国纷纷成立了橡胶草产业联盟推进其产业化进程,解决本国天然橡胶不能自给自足的问题。本研究主要以橡胶草优良品系K445为研究对象,系统研究了它的繁育技术和栽培技术及田间管理,结果如下:1、高效繁育技术:（1）通过正交试验设计研究了高锰酸钾浓度、浸泡时间和温度对橡胶草种子萌发率、萌发整齐度、萌发指数等的影响,揭示了温度是影响橡胶草种子萌发的关键因子,发现了新的橡胶草种子萌发技术:即橡胶草种子浸泡在0.7%的高锰酸钾溶液中,浸泡时间为2h,处理温度为23℃。（2）通过单因素试验设计研究了消毒时间、激素种类和浓度对橡胶草组织诱导率和生根率的影响,建立了高效的橡胶草组织培养与快速繁殖体系:即用0.1%氯化汞消毒叶片6 min,然后在MS+2.0 mg·L-16-BA+1.0 mg·L-12,4-D培养基中进行愈伤组织诱导,在MS+2.0 mg·L-16-BA+0.1 mg·L-1NAA培养基中进行不定芽分化,在1/2MS+0.2mg·L-1NAA培养基中诱导生根,生根率为93.3%。（3）在建立组织培养再生体系基础之上,通过单因素试验设计,研究了不同培养基养分水平、渗透性化合物种类和生长抑制剂种类对橡胶草种质离体保存的影响,形成了橡胶草种质离体保存技术:在基本培养基降至1/2MS培养基中添加30 mg·L-1甘露醇和2.0 mg·L-1脱落酸,橡胶草组培苗保存期限可达10个月,恢复生长好。2、栽培技术:（1）通过盆栽单因素试验,使用方差分析和趋势分析研究了不同灌溉频率对橡胶草生长和产量的影响,发现了橡胶草生长的最适土壤含水量为28.0%,并明确了土壤含水量与橡胶草产量的关系:当土壤含水量从22.8%增加到38.9%时,橡胶草橡胶产量变化趋势显着符合立方多项式方程;橡胶草总糖产量变化趋势显着符合立方多项式方程。（2）通过田间单因素试验设计,利用方差分析和趋势分析法研究了氮、钾、钾基肥对橡胶草生长和产量的影响,确定了橡胶草当地的适宜施量为:尿素107.2 g·m-2,过磷酸钙43.4 g·m-2,氯化钾10.5 g·m-2。发现了（A）氮基肥与橡胶草产量关系为:当施氮基肥从0增加到107.2 g·m-2时,橡胶产量变化趋势显着符合线性方程,总糖产量变化趋势显着符合线性方程。（B）发现了磷基肥与橡胶草产量及其构成因子之间的关系:当施磷基肥从0增加到10.5g·m-2时,橡胶产量变化趋势显着符合线性方程,总糖产量变化趋势显着符合线性方程。（C）发现了钾基肥与橡胶草产量关系为:当施钾基肥从0增加到35.3 g·m-2时,橡胶产量变化趋势显着符合平方多项式方程,总糖产量变化趋势显着符合线性方程。（3）通过大田单因素试验研究了不同栽培密度对橡胶草生长和产量的影响,推荐橡胶草栽培密度为20×20 cm,此时橡胶产量最高;并发现了栽培密度与橡胶草产量的关系为:当栽培密度从9.9株/m2增加到53.8株/m2时,橡胶产量变化显着符合线性模型,总糖产量变化显着符合线性模型。（4）通过大田单因素试验研究了橡胶草叶片生物量和产量在不同土壤pH环境下的响应,确定了适宜橡胶草生长的土壤pH,推荐土壤pH为8.3,此时橡胶产量最高;并发现了土壤pH与橡胶草产量之间的关系:当土壤pH从6.8提高到8.3时,橡胶产量变化趋势显着平方多项式方程,当总糖产量变化趋势显着符合平方多项式方程。3、橡胶草生物量估计与栽培技术优化:（1）叶片生物量估计模型:通过多元线性逐步回归法,建立了橡胶草叶片生物量与叶片长度和宽度之间的估计模型:即,LB=11.8334.465*L+23.5*W+0.004*L*W+49.945*L0.5-115.611*W0.5+0.011*L2-0.219*W2,其中LB为叶片生物量（干重,mg）,L为叶片长度（mm）,W为叶片宽度（mm）,模型最少采样数量为15个叶片在统计学上有意义。（2）根生物量估计模型:通过多元线性回归方法,发现了根生物量与分根数、茎直径、叶簇数、叶片干重之间的关系,建立了橡胶草根生物量估计模型;即RD=-0.902+1.316LD-2+0.139SD-0.049LN,式中RD为根生物量（g）,LD为叶片干重（g）,LN为叶簇数,SD为茎直径（cm）。（3）在前面单因素试验结果的基础上,通过多元线性回归方法,建立了不同环境条件下,橡胶草叶片生物量、根生物量、橡胶产量和总糖产量与土壤有效氮、磷、钾含量、土壤含水量、栽培密度、土壤pH的回归方程,形成了橡胶草栽培技术优化模型,通过模型预测:当土壤含水量为28.0%,土壤速效氮、磷、钾含量分别为160、82.4、302 mg·kg-1,栽培密度为53.8株/m2,土壤pH为6.8时,橡胶草叶片生物量最高,为227.0 g·m-2;当土壤含水量为28.0%,土壤速效氮、磷、钾含量分别为328、87.8、357.2 mg.kg-1,栽培密度为13.4株/m2,土壤pH为6.8时,橡胶草根生物量最高,为221.0 g·m-2;当土壤含水量为28.0%,土壤速效氮、磷、钾含量分别为160、76.9、339 mg·kg-1,栽培密度为53.8株/m2,土壤pH为6.8时,橡胶草橡胶产量最高,为16.1 g·m-2;当土壤含水量为28.0%,土壤速效氮、磷、钾含量分别为160、76.9、339 mg·kg-1,栽培密度为53.8株/m2,土壤pH为6.8时,橡胶草总糖产量最高,为111.2 g·m-2。
汤燕姗[2]（2020）在《梨试管苗种质资源保存的研究》文中研究说明本试验以黄花梨试管苗为试材,研究黄花梨离体培养保存,并筛选出最佳保存培养基。结果显示:最佳保存培养基为MS+6-BA(0.5 mg·L-1)+IBA(0.1 mg·L-1)+琼脂(6.0g·L-1)+蔗糖(30 g·L-1)+PP333(6 mg·L-1)+甘露醇(5 g·L-1)。以此为培养基,将梨10份种质资源进行离体试管苗保存,并对保存了6个月的10份种质资源的生长情况进行了观察。
徐盼盼[3]（2020）在《金钻蔓绿绒组培苗离体保存技术研究》文中研究说明金钻蔓绿绒（Philodendron‘con-go’）是天南星科（Araceae）、喜林芋属（Philodendron Schott）观叶类花卉,是居家及公共场所绿化的优良植物,市场需求量大,组培快繁是金钻蔓绿绒种苗繁育的主要途径之一。本研究以金钻蔓绿绒组培苗为试验材料,研究不同蔗糖、甘露醇和生长抑制剂及培养基对金钻蔓绿绒组培苗离体保存的影响,将保存后的组培苗进行恢复生长,并开展了驯化移栽,建立了完整的金钻蔓绿绒组培苗离体保存体系,为金钻蔓绿绒组培苗规模化生产及推广应用提供技术支撑和理论依据。主要研究结果如下:1.金钻蔓绿绒组培苗缓慢生长离体保存研究添加0～5g/L的蔗糖、15～30g/L的甘露醇,金钻蔓绿绒离体保存成活率高,分别为80%、90%,70%、80.5%;株高变化较小,SPAD值分别为33.32、43.86,37.47、20.77;相对电导率分别为33.19、35.40,33.21～34.16;增殖系数分别为3、3.67、8.67、12;蔗糖处理组培苗生物量增加,甘露醇处理组培苗生物量减小,组培苗显微结构良好,有利于金钻蔓绿绒组培苗离体保存。添加3～4mg/L的ABA,组培苗生长良好,成活率高分别为83.33%、80%,SPAD值为57.34、58.88,相对电导率29.88、33.21,增殖系数3.67、3。添加1.0～1.5mg/L的PP333,组培苗成活率为70%、80.33%,生长势佳,利于壮苗;SPAD值为58.08、60.90,相对电导率24.09、27.86,增殖系数4、3。添加3～4mg/L的B9,组培苗成活率分别为83.33%、80%,生长势佳,株高变化小,SPAD值为57.34、58.88,相对电导率29.88、33.21,增殖系数3.67、3。在生长抑制剂处理下,在金钻蔓绿绒组培苗生物量变化小,组培苗叶片显微结构栅栏组织和海绵组织逐渐加厚,有利于金钻蔓绿绒组培苗离体保存。不同培养基营养成分试验:减少MS培养基中大量元素含量,成活率较低,在50%～62.5%之间,组培苗枯叶严重,保存效果不佳,不利于金钻蔓绿绒组培苗离体保存。对金钻蔓绿绒组培苗进行相关性分析:株高和增殖系数呈极显着负相关（P<0.01）,增殖系数和SPAD值呈极显着负相关（P<0.01）,说明组培苗株高和增殖系数成反比关系。通过主成分分析及隶属函数综合评价发现:离体保存效果:B3>A4>P3>P2>B2>T0、T5>G15>CK>A3>G30。2.金钻蔓绿绒组培苗离体保存后恢复生长研究金钻蔓绿绒组培苗离体保存后恢复生长60d中,比较株高,茎粗,恢复生长率及SPAD值等地上部生物学特征和组培苗生根情况发现,离体保存后的金钻蔓绿绒组培苗与对照苗相比无显着性差异,恢复生长率均达100%;离体保存后的组培苗POD和SOD酶活性逐渐与对照苗酶活性相近,恢复生长的组培苗与对照苗在生物学特征上无显着性差异。离体保存后的金钻蔓绿绒组培苗保持了其遗传稳定性,离体保存方法可行。3.金钻蔓绿绒组培苗离体保存后驯化移栽研究金钻蔓绿绒组培苗离体保存后驯化移栽,离体保存后的组培苗移栽后其生物学特征、SPAD值及生根能力与对照组培苗无显着性差异。移栽成活率达90%以上。株高、茎粗、叶长、叶宽、叶片数及生根方面均与对照组培苗一致。离体保存后的金钻蔓绿绒组培苗可以恢复至正常的生长状态。
王小乐[4]（2018）在《菊花低温离体缓慢生长保存技术研究》文中认为菊花原产我国,是中国十大名花和世界四大鲜切花之一,具有观赏、食用、饮用和药用等多种价值。菊花栽培历史悠久,品种众多,目前主要依靠田间种植保存,需消耗大量人力物力,且易受到涝害、虫害和病害的影响而损失。常温下的离体培养保存时间较短,需要较频繁的继代培养,增加人工成本,也易增加无性系变异的几率,因此利用低温库进行离体保存是菊花种质资源保存的发展方向。本试验旨在探究菊花低温下缓慢生长离体保存技术。本研究首先选取170个菊花品种在低温库中探究低温离体条件下菊花品种间生长差异,然后选取‘蒙娜丽莎黄’、‘橙安娜’、‘小洋菊’和‘南农橙乒乓’4个生长特性差异大的菊花品种试管苗为材料,比较在低温下不同浓度蔗糖和甘露醇处理对不同菊花品种离体保存的影响。再以‘蒙娜丽莎黄’试管苗为材料,探究蔗糖和甘露醇复合处理对菊花低温离体保存的影响,并对保存结束后试管苗的恢复生长能力和遗传稳定性进行检测,以期为菊花种质资源的离体保存提供技术支持。主要研究结果如下:1.低温离体条件下菊花试管苗生长差异分析:在（7±2）℃下,以MS基本培养基保存170个菊花品种试管苗,保存6个月测量其株高、叶片数、绿叶数和枯叶数。结果表明,低温下菊花试管苗在品种间存在较大变异,其中绿叶数和枯叶数变异幅度较大,达到了 50%以上,而株高和叶片数变异为27.6%和25.7%;试管苗的株高和枯叶数分布呈偏态分布,叶片数和绿叶数呈正态分布;不同品种菊花试管苗的株高与叶片数、叶片数与绿叶数、叶片数与枯叶数存在显着正相关性;对试管苗枯叶率进行聚类分析,可以将170个品种聚成3类,第一类衰老缓慢,包含‘南农橙乒乓’等6个品种,第二类衰老速度中等,包含‘南农双娇’等101个品种,第三类衰老快,包含‘蒙娜丽莎黄’等63个品种。2.甘露醇和蔗糖对菊花低温离体保存的影响:以4个不同生长势的菊花品种为材料,在（7±2）℃条件下,探究45、60、75和90 g·L-1蔗糖,5、10、15和20 g.L-1甘露醇处理对菊花试管苗离体保存的影响。试验每3个月观察并统计试管苗的株高、绿叶数和枯叶数,保存12个月后观察试管苗叶片和茎段的组织结构,并对试管苗的恢复生长能力和遗传稳定性进行检测。结果发现,保存12个月后,在MS培养基中添加15 g.L-1甘露醇对‘南农橙乒乓’和‘小洋菊’试管苗的离体保存效果最佳,存活率分别达86.67%和93.33%;而20 g·L-1甘露醇对‘蒙娜丽莎黄’和‘橙安娜’保存效果最优,存活率可达80%和93.33%。60 g·L-1蔗糖保存‘南农橙乒乓’和‘小洋菊’12个月的存活率达70%以上,但相比甘露醇处理,绿叶数少、生长状况差,保存效果不好;高浓度蔗糖（45-90 g·L-1）对‘蒙娜丽莎黄’和‘橙安娜’保存效果不佳。保存12个月后,4个品种的叶片和茎段细胞间隙减小,细胞密度增加。保存12个月后试管苗恢复正常培养生长良好,株高、叶片数、茎粗和节间长等形态指标及SSR分子标记图谱与对照相比无差异,保持了良好的遗传稳定性。3.甘露醇与蔗糖复合处理对菊花低温离体保存的影响:以菊花‘蒙娜丽莎黄’为材料,在（7±2）℃下,MS培养基中添加（0、15、30、45和60 g·L-1蔗糖）和（0、5、10、15和20 g·L-1甘露醇）复合处理,每3个月观察统计菊花试管苗的存活率、株高、绿叶数和枯叶数,对保存12个月后植株恢复生长能力和再生植株遗传稳定性进行检测。结果表明,15 g·L-1蔗糖与15 g·L-1甘露醇复合处理存活率最高,保存至12个月存活率达93.33%,枯叶率仅为17.6%,生长良好;0 g·L-1蔗糖与5 g·L-1甘露醇处理保存12个月存活率达86.67%;30 g·L-1蔗糖下,随甘露醇浓度增加存活率递增,20 g·L-1甘露醇处理存活率最高,保存至12个月存活率为86.67%,枯叶率35.2%,生长状况较好;而高浓度蔗糖（45、60 g·L-1）与甘露醇复合处理对试管苗保存效果不佳。保存12个月后试管苗叶片和茎段细胞变小、细胞密度增加;恢复正常培养后生长良好,形态正常,SSR-PCR扩增图谱与对照相比无差异,保持了良好的遗传稳定性。
黄天启[5]（2018）在《若干种枇杷属植物的超低温保存》文中提出枇杷属植物（Eriobotrya Lindl.）原产我国西南地区或与我国西南毗邻的几个东南亚国家,至少有31个种或变种。我国的枇杷属植物种质资源十分丰富,拥有世界上最丰富的栽培枇杷和野生枇杷资源。枇杷具有抗炎,抗氧化,保护肝和神经系统,以及富含其他功能性物质,但随着人类活动的增加,野生枇杷的栖息地日益减少,栽培枇杷种质也日渐单一,因此,对枇杷属植物种质资源超低温保存技术进行系统性的研究,对枇杷属植物种质资源长期稳定的保存有重要意义。本研究以枇杷属植物5种材料为试材,研究了枇杷属植物的茎尖快繁体系,并在此基础上,进行了枇杷属植物的超低温保存研究,包括超低温保护剂的探索和基于程序降温玻璃化法的枇杷属植物茎尖超低温保存,主要研究结果如下:1.枇杷属植物茎尖快繁体系的建立研究了不同植物生长调节剂的配比对枇杷属植物的幼胚离体培养和茎尖快繁的影响,同时为研究枇杷属植物的茎尖超低温保存提供实验材料和实验基础。主要结果包括:进行了枇杷属植物4个种和1个杂交后代材料的胚离体培养,最佳的配方为:MS+6-BA 1.0 mg/L+KT 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L,在此培养基中,所有试验的材料通过胚培养均得到了试管苗;同时,实验着重探索了实验所涉枇杷属植物的茎尖快繁体系,确定了MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L作为最适合枇杷属植物茎尖诱导的培养基,能大量繁殖丛芽,其中,台湾枇杷与‘解放钟’的杂交后代最高的茎尖增殖系数可达13.4。2.氧化三甲胺（TMAO）对枇杷属植物茎尖超低温保存的影响与DMSO相比,TMAO作为超低温保护剂,具有对枇杷属植物毒害较小且有利于其恢复生长,冷冻前不需要更换保护液,操作步骤简单的特点,其主要成分由MS液体培养基+0.5 M蔗糖+15%（w/v）PEG 30%（w/v）甘油+10%（w/v）TMAO构成。试验结果表明:台湾枇杷与‘解放钟’的杂交后代茎尖的超低温保存后的存活率达到73.41%。3.若干种枇杷属植物的超低温保存本实验采用了几种具有一定代表性的野生枇杷和栽培枇杷作为外植体的来源,利用TMAO作为一种未曾在枇杷属植物中报道过的超低温保护剂,在枇杷属植物的茎尖超低温保存中效果明显,并对超低温保存的降温程序在玻璃化转变温度区间进行了优化。结果表明,优化的超低温保存方法在几种枇杷属植物的茎尖超低温保存都获得了一定成功,建立了一套可能适合大部分枇杷属植物的超低温保存体系。
刘义存,黄天启,林顺权[6]（2016）在《枇杷属植物野生种的常温离体保存研究》文中进行了进一步梳理以枇杷属植物野生枇杷6个种为试材,研究离体保存的培养环境条件,植物生长调节剂和培养基添加物质的种类及配比,以及植株再生与长愈伤组织、长根之间的关系对枇杷属植物野生种的常温离体保存的影响。结果表明,供试枇杷属植物常温离体保存的最佳条件为,每天光照24h,（18±1）℃;保存植株的最佳状态为不长愈伤组织,不生根;最佳培养基配方为MS+NAA 0.5mg/L+蔗糖30 g/L+KT 1.0mg/L+AC 0.1 g/L,保存第18个月植株存活率仍为100%。而石斑木×台湾枇杷杂交后代保存最佳培养基配方为MS+蔗糖30 g/L+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.1mg/L。
刘连军,黎萍,李恒锐,彭靖茹,李慧敏[7]（2016）在《木薯种质资源离体保存技术研究》文中进行了进一步梳理为探讨木薯（Manihot esculenta Crantz）种质资源的离体保存方法,以GR891木薯品种试管苗为试材,研究了植物生长抑制剂（PP333、B9、S3307、ABA）对试管苗在常温（25℃）条件下的保存效果。结果表明,在培养室温度（25±2）℃、光照度15002 000 lx、光照时间12 h/d的条件下,培养基中加入PP333、B9和S3307均可提高木薯试管苗的存活率。在MS+6-BA 0.2 mg/L+NAA 0.1 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂6.5 g/L培养基上,木薯常温保存的适宜PP333质量浓度为1.01.5 mg/L或B9和S3307质量浓度均为0.51.0 mg/L,保存240 d时存活率超过90%,试管苗根系发达、叶色浓绿、生长健壮,0.22.0 mg/L ABA培养基上试管苗长势和存活率都明显低于CK（对照）。
臧玉文[8]（2015）在《红香芋离体保存技术的研究》文中研究表明芋（Colocasia esculenta（L.）Schott）以地下球茎作为繁殖器官和消费产品,属于典型的无性繁殖植物。其球茎内含丰富的营养物质,尤其是淀粉等碳水化合物含量较多,不仅是重要的蔬菜和粮食作物,还具有较高的药用价值。我国是芋的原产地之一,栽培历史悠久,拥有丰富的芋种质资源,但由于长期地无性繁殖方式,再加上受到病虫害的影响,导致种性退化,芋的生产受到严重的经济损失。因此,保存芋优良品种资源显得非常重要,对芋生物多样性保护和优质高效生产有重要的意义。相比于田间种植保存,种质资源的离体保存技术更具有优越性。本试验以江苏金坛的优良地方品种建昌红香芋为试材,主要进行了以下研究:1)比较了脱落酸（ABA）、矮壮素（CCC）、甘露醇和山梨醇四种不同浓度的化学药剂对芋试管苗继代培养存活期的影响;2)利用玻璃化法冻存芋离体茎尖,探讨了预培养、玻璃化保护液装载与脱水、化冻等玻璃化超低温保存关键因素对茎尖保存效果的影响;3)评价了不同浓度蔗糖、KN03和水杨酸（SA）对试管球茎形成的影响;4)探讨了在高浓度蔗糖诱导条件下,芋试管球茎形成及膨大过程中主要碳水化合物含量的变化规律,以及与相关酶活性的关系。主要研究结果如下:1.利用四种不同化学药剂使芋试管苗缓慢生长,结果表明:CCC抑制试管苗生长的效果最好,ABA效果次之。在培养基中添加浓度为0.5-8 mg· L-1的CCC,可使芋试管苗的继代培养时间延长至150d,存活率在72%以上;在培养基中添加浓度为2.5 mg· L-1的ABA,试管苗保存150d,存活率为52%。甘露醇和山梨醇效果较差,在培养基中添加不同浓度的甘露醇或山梨醇,随保存时间延长,死亡率不断增加。经过上述不同方法保存的试管苗,在继代培养90 d后转入正常培养基,均能恢复生长,并且株高、茎粗等生长指标和总叶绿素、丙二醛含量等生理指标,与正常继代培养的试管苗无显着差异。2.利用玻璃化法超低温保存试管苗茎尖,结果显示:芋茎尖在含0.6 mol· L-1蔗糖的MS培养基中预培养3 d,存活率最高,为55.56%;经60%PVS2装载30 min,再经PVS2脱水15 min,芋茎尖含水量较少,为57.23%,存活率最高,为65.08%;在同一温度下化冻1 min或2min,对芋茎尖存活率无显着影响,40℃水浴条件更有利于芋茎尖的化冻。经过玻璃化法冻存的芋茎尖转入再生培养基中,其再生率为39.68%,形成的试管苗和对照在形态上无明显差异。综上所述,适合红香芋的玻璃化法超低温保存的关键技术参数为:芋试管苗茎尖在含0.6 mol·L-1蔗糖的MS培养基预培养3 d,然后先用60%PVS2装载30 min,再用PVS2脱水15 min,放入盛有新鲜PVS2的冻存管,置于液氮中冷冻保存。经液氮冷冻保存的茎尖,先在40℃水浴中化冻1-2 min,再利用含有1.2 mol · L-1蔗糖的MS液体培养基洗涤,即可进行再生培养,并可获得正常试管苗。3.利用不同化学药剂诱导试管球茎形成,结果表明:培养基中添加适宜浓度的蔗糖、KN03和SA,均可诱导试管球茎形成。蔗糖以60 g·L-1的浓度效果最好,诱导率为89.3%,试管球茎形成早,球茎质量较大;KN03以50mmol · L-1浓度为宜,诱导率为94.6%,试管球茎平均鲜重为0.80 g;SA的适宜浓度为0.1-0.5 mmol · L-1,试管球茎诱导率在80%以上,但球茎的质量不如蔗糖和KN03诱导形成的球茎。4.利用60 g· L-1蔗糖处理20 d,芋试管苗基部开始膨大;处理50 d,多数试管植株叶片和叶柄枯萎,基部膨大形成球茎。在芋试管球茎膨大过程中,果糖、葡萄糖和总可溶性糖含量均呈先升高后降低的变化趋势,果糖含量在诱导至27 d时即达到最大值,而总可溶性糖和葡萄糖含量均在第34d达到峰值;蔗糖含量呈现先上升、后下降、再上升的变化趋势,在培养48 d时积累量达到最大值。试管球茎总淀粉含量、直链和支链淀粉含量均随培养时间的延长而增加,至膨大后期淀粉总含量约占干重的76%,并以支链淀粉含量为主。诱导培养至41 d时,芋试管球茎的ADPGPase和Q-酶活性均达到最大值,分别为1.22μmol·g-1·min-1和2.39μmol·g-1·min-1。分别对ADPGPase活性和总淀粉含量、Q-酶活性和支链淀粉含量两组变量进行相关性分析发现,从茎基部开始膨大（20 d）至ADPGPase和Q-酶酶活性达峰值（41 d）时,相关系数分别为0.819（P<0.01,n=12）和0.738（P<0.01,n=12）,均呈极显着正相关。
金建涛[9]（2013）在《尤溪金柑等柑橘类种质离体保存及其Fc-MLP2基因克隆与表达》文中研究指明本试验以尤溪金柑（金弹Fortunella crassifolia cv. Youxijingan）等柑橘类植物试管苗为材料，进行了尤溪金柑再生体系建立与优化、柑橘类植物种质资源保存、尤溪金柑Fc-MLP2基因的克隆表达、Fc-MLP2基因转化烟草及Fc-MLP2基因功能的初步鉴定等研究。主要结果如下：1尤溪金柑再生体系建立及优化本试验优化筛选出了适合尤溪金柑试管苗增殖和生根的培养基。结果表明：KT对芽的增殖有促进作用；NAA和KT共同作用下，处理G2（MS+NAA0.05mg/L+KT1.5mg/L）的芽增殖系数显着高于其它处理；NAA和BA共同作用下，影响芽增殖的主次因素为BA> BA*NAA>NAA，芽增殖的最优培养基为：MS+6-BA1.2mg/L+NAA0.05mg/L，增殖系数最高，达到了10.60；影响生根的主次因素为NAA> IBA> NAA*IBA，生根最优培养基为：MS+NAA0.3mg/L+IBA0.2mg/L，生根率最高达到了83.33%，生根数均值达到了3.27个。2尤溪金柑等柑橘类植物种质资源保存本试验以尤溪金柑为材料，研究了培养容器、培养基中的CaCl2、甘露醇和PP333等因素对柑橘种质资源缓慢生长保存的影响。结果表明：当CaCl2的浓度为0.22g/L时，尤溪金柑试管苗的根冠比最大，比较适合柑橘种质资源缓慢生长保存；在CaCl2、甘露醇和PP333共同作用下，分别在保存6个月和12个月时统计试管苗成活率，结果表明：保存6个月和12个月时处理C4(MS+CaCl20.44g/L+甘露醇0g/L+PP3331mg/L)中尤溪金柑试管苗的存活率均为最高，分别达到了100%和97.8%。本试验在原有保存3年的67份柑橘种质资源的基础上新收集了25份柑橘种质资源，并对所收集种质资源试管苗的生长状态进行观察记录。结果显示：柚类种质资源试管苗生长比较健壮，根系发达，叶片大而浓绿，但徒长严重，叶片较为稀疏；野生柑橘类试管苗长势普遍较弱，根系和茎杆都较弱，转接继代时还发现，该类试管苗生根能力也很弱；金柑类和宽皮柑橘类试管苗的长势介于柚类和野生柑橘试管苗之间。3Fc-MLP2基因的克隆与生物信息学分析本试验采用RT-PCR结合RACE技术，第一次以尤溪金柑试管苗为材料，克隆得到尤溪金柑Fc-MLP2基因的全长cDNA序列，其在GenBank中的登录号为JX310276。Fc-MLP2基因全长908bp，含有一个669bp的开放阅读框，编码223个氨基酸。生物信息学分析表明：该蛋白是定位于细胞外的一种疏水性分泌蛋白，具有2个功能位点、13个磷酸化位点和信号肽，其二级结构由α螺旋、β折叠、β转角、无规则卷曲组成。系统进化树分析表明：尤溪金柑Fc-MLP2蛋白与粗皮柠檬RlemMLP2蛋白亲缘关系较近，聚为同一类。推测Fc-MLP2蛋白可能在植物抗虫、抗病原菌、抗饥饿和延缓植物衰老方面起到一定作用。4尤溪金柑种质资源保存过程中Fc-MLP2基因的定量表达采用qRT-PCR技术，以18S rRNA基因为内参基因，对尤溪金柑试管苗不同保存阶段Fc-MLP2基因的mRNA转录表达进行研究，结果表明：Fc-MLP2基因在尤溪金柑保存过程中各时期都有表达，保存4个月时相对表达量最高；保存0个月和12个月时Fc-MLP2基因表达量很低，12个月时达到最低；保存8个月时Fc-MLP2基因的表达量与保存6个月时又有所增加，之后随着时间的延长Fc-MLP2基因相对表达量逐渐减少；尤溪金柑保存过程中Fc-MLP2基因的相对表达量与保存过程中尤溪金柑的生长状态密切相关，当尤溪金柑的生长活动较活跃、保存过程中有新叶发出时，Fc-MLP2基因的相对表达量较高。5尤溪金柑Fc-MLP2转化烟草与功能验证本试验通过XbaⅠ和SalⅠ双酶切技术构建pCAMBIA1301-Fc-MLP2表达载体，并转化到农杆菌EHA105中。农杆菌介导法将Fc-MLP2基因导入烟草，潮霉素抗性筛选后对抗性植株进行PCR检测和GUS检测。结果显示：目的基因片段已成功转入到烟草中，转化率为62.22%。低温（4℃）和机械损伤处理转基因烟草，分别在处理后的0、3、6、12、24、48h时取样进行qRT-PCR扩增，检测不同时间段Fc-MLP2基因的表达量变化。结果显示；低温处理后转基因烟草中Fc-MLP2基因相对表达量均显着减少；转基因烟草在受到机械伤害12h后，Fc-MLP2基因相对表达量显着增加。可以推测，Fc-MLP2基因可起到抵御逆境的作用。
李丽秀[10]（2013）在《枇杷种质限制生长保存及乙烯代谢与信号转导相关基因等克隆及表达》文中指出本试验首先以“早钟6号”枇杷为材料，进行胚培养及其试管苗保存条件的优化研究，并离体保存了21份枇杷资源的试管苗；同时，以“早钟6号”试管苗叶片为材料，克隆得到乙烯信号转导相关基因ETR、ERS以及抗氧化相关基因CAT的cDNA全长序列，并以枇杷试管苗离体保存不同时期叶片为材料，进行ETR、ERS、CAT等3个基因及本实验室音建华（2010）已克隆的2个基因ACS和ACO在离体保存过程中表达量的qPCR分析。主要研究结果如下：1枇杷胚培养及试管苗的获得以早钟6号枇杷幼胚为材料，研究不同浓度GA3及光质对幼胚萌发率的影响。不同浓度GA3对幼胚的萌发影响较大，其中1/2MS+0.2mg·L-1NAA+0.5mg·L-16-BA+0.5mg·L-1GA3的萌发率最高；不同光质对枇杷幼胚对幼胚萌发率影响不大，红光、蓝光均促进幼胚萌发。在枇杷成熟胚培养中，6-BA对枇杷成熟胚萌发率影响最大，NAA影响最小，适合的萌发培养基为MS+0.5mg·L-12,4-D+1.0mg·L-16-BA+0.5mg·L-1NAA。2枇杷试管苗的增殖培养和生根培养将枇杷幼胚萌发得到的试管苗，接入添加不同浓度的TDZ或KT的增殖培养基中，研究TDZ或KT对枇杷试管苗增殖的影响。结果发现适合枇杷试管苗增殖培养的培养基为MS+0.1mg·L-1NAA+1.0mg·L-1TDZ或MS+0.1mg·L-1NAA+0.5mg·L-1KT。最适合的生根培养基为0.5mg·L-1NAA+0.2mg·L-1IBA+1/2MS，生根率为93.095%。321份枇杷种质资源试管苗的离体保存研究本试验将枇杷试管苗接入1/3MS+4.0mg·L-1PP333培养基上，分别置于4种不同光质下培养，探讨不同光质对试管苗离体保存的影响。红光有利于枇杷试管苗的离体保存，枇杷试管苗在红光条件下，离体保存效果较好，保存11个月时，试管苗存活率仍有70%以上。另外，收集21份枇杷资源，将枇杷胚接种在1/2MS培养基上萌发，并直接对21份枇杷资源进行离体保存，21份枇杷种质资源离体保存存在差异。4枇杷试管苗叶片乙烯受体基因ETR基因的克隆以枇杷试管苗叶片为材料，采用同源克隆方法得到3条ETR1cDNA全长序列，分别命名为Ej-ETR1a、Ej-ETR1b、Ej-ETR1c，编码相同的741个氨基酸；4条ETR2cDNA全长序列，分别命名为Ej-ETR2a、Ej-ETR2b、Ej-ETR2c、Ej-ETR2d，编码相同的741个氨基酸。各基因cDNA序列GenBank检索号分别为JX307084、JX307087、JX996185、JX307089、JX307090、JX307091、KC709505。根据生物信息学分析，推测两类ETR蛋白均是不稳定的疏水性蛋白，不含信号肽；在N-端疏水区存在3个跨膜区，属于跨膜蛋白；有一个螺旋卷曲结构，亚细胞定位于细胞膜中，具有8个保守结构域，均属于ethylene sensor家族；ETR1蛋白具有30个功能位点，32个磷酸化位点，ETR2蛋白有28个功能位点，35个磷酸化位点，两个基因的氨基酸序列相似性为95.28%，均属于乙烯受体ETR1亚家族5枇杷试管苗叶片乙烯受体基因ERS基因的克隆从枇杷试管苗叶片中克隆得到1条ERS cDNA序列，全长2170bp，编码673个氨基酸，GenBank检索号为JX307088。对该蛋白进行生物信息学分析，推测该蛋白为不稳定的疏水性蛋白，不含信号肽，亚细胞定位于细胞膜；除了近N-端的3个跨膜区域外，Ej-ERS蛋白还有294-315aa及320-341aa两处跨膜区；该蛋白有1个螺旋卷曲结构，28个功能位点，26个磷酸化位点，与枇杷ETR1、ETR2同属于乙烯受体ETR1亚家族。6枇杷试管苗叶片CAT基因的克隆采用同源克隆方法，从枇杷试管苗叶片中得到6条CAT cDNA序列全长，其中1条CAT1序列、5条CAT2序列，分别命名为Ej-CAT1、Ej-CAT2、Ej-CAT2-2、Ej-CAT2-3、Ej-CAT2-4、Ej-CAT2-5。GenBank检索号分别为：JX307086、JX307085、JX996184、JX996186、JX996187、JX996188。对CAT1及CAT2推到的氨基酸进行生物信息学分析，两个蛋白均编码492个氨基酸，是亲水蛋白，不含信号肽，不存在螺旋卷曲结构，是非跨膜蛋白，亚细胞定位于过氧化物酶体；CAT1及CAT2蛋白分别有18、17个功能位点，22、19个磷酸化位点，是以Ser为主，Thr、Tyr为辅发生磷酸化反应。7枇杷试管苗离体保存过程中乙烯代谢与信号转导相关基因等表达的qPCR分析本试验以在1/3MS+4.0mg·L-1PP333培养基上离体保存的不同时期枇杷试管苗叶片为材料，以Actin为内参基因，采用qPCR方法分析枇杷乙烯代谢与信号转导相关基因ETR、ERS、ACS、ACO以及抗氧化相关基因CAT在离体保存过程中的表达规律。结果表明：5个基因在6个不同保存时期均有表达。其中，ETR基因整体表达量先降低后上升，最后趋向平稳，保存1个月时表达量最高，保存5个月表达量最低；ERS基因表达量呈“W”状，保存7个月表达量最高，保存5个月时表达量相对最低；ACS基因表达量变化较复杂，整体趋势先上升后下降，之后又有所上升，最后又开始下降直至降到最低值（保存11个月）；ACO基因的表达量在保存1个月及4个月时较高，其后的4个时期表达量没有明显变化；而CAT基因表达量的整体趋势呈字母“W”形状，保存1个月时表达量最高，7个月时表达量最低。在枇杷试管苗离体保存的整个过程中，乙烯受体基因ETR、ERS与ACS表达模式基本相似，但在保存4个月、11个月时ACS表达量与受体基因表达量变化趋势相反，4个月ACS表达量增加，而受体基因的表达量则降低；11个月时，ACS表达量下降，ETR、ERS表达量则略升。枇杷ACO基因除了在4、7个月表达量动态变化不一致外，其余几个时期的变化规律几乎与ETR、ERS表达量变化趋势类似。ACS与ACO表达量动态变化趋势基本一致，且ACS每个时期表达量均高于ACO的表达量。前2个时期表达量增加，可能是由于试管苗生长发育进入叶片成熟和衰老阶段，乙烯合成量增加；而在离体保存后4个时期，试管苗新的侧芽开始生长，抽出新的枝叶，并慢慢发育成熟，但ACO表达量却无明显变化，乙烯生成量趋于稳定，这可能跟乙烯受体表达量变化有关。ACS处于ACO的上游，每个时期的ACS基因的表达量均高于ACO基因的表达量，说明经ACS合成的ACC可能除了生成乙烯外，还转化成N-丙二酰-ACC进行分流，从而调节乙烯的生物合成。离体保存条件下，乙烯受体基因ETR和ERS基因表达量整体变化具有类似的规律。而且两个受体基因ETR、ERS可能除了结合乙烯外，还起到调节乙烯敏感性的作用。乙烯代谢与信号转导相关基因在枇杷试管苗离体保存中具有重要作用。
二、枇杷种质资源的离体保存研究Ⅱ生长抑制剂的影响（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、枇杷种质资源的离体保存研究Ⅱ生长抑制剂的影响（论文提纲范文）
（1）橡胶草高效繁育、栽培技术与管理优化研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 1 绪论 |
| 1.1 天然橡胶 |
| 1.2 橡胶草形态特征与价值 |
| 1.2.1 橡胶草形态特征 |
| 1.2.2 橡胶草价值 |
| 1.3 橡胶草发展历史 |
| 1.4 橡胶草产业化现状 |
| 1.5 橡胶草繁殖技术研究现状 |
| 1.5.1 种子萌发技术 |
| 1.5.2 组织培养技术 |
| 1.5.3 根茎扦插技术 |
| 1.6 橡胶草栽培技术研究现状 |
| 1.6.1 营养元素对橡胶草产量的影响 |
| 1.6.2 水分对橡胶草橡胶产量的影响 |
| 1.6.3 栽培密度对橡胶草产量的影响 |
| 1.6.4 土壤pH对橡胶草橡胶产量的影响 |
| 1.6.5 其它影响橡胶草橡胶产量的因素 |
| 1.7 论文研究基本思路和技术路线 |
| 2 研究地点和试验方法 |
| 2.1 前言 |
| 2.2 研究地点 |
| 2.3 植物材料 |
| 2.4 试验方法 |
| 2.4.1 土壤理化性质 |
| 2.4.2 橡胶草形态指标 |
| 2.4.3 橡胶草理化指标 |
| 3 橡胶草种子高效萌发技术研究 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 材料与方法 |
| 3.2.1 材料 |
| 3.2.2 试验设计 |
| 3.2.3 试验方法 |
| 3.2.4 数据处理与分析 |
| 3.3 结果与分析 |
| 3.3.1 正交试验 |
| 3.3.2 结果验证实验 |
| 3.4 讨论 |
| 3.5 本章小结 |
| 4 橡胶草组织培养技术 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 材料与方法 |
| 4.2.1 植物材料 |
| 4.2.2 研究方法 |
| 4.3 结果与分析 |
| 4.3.1 外植体选择 |
| 4.3.2 外植体消毒时间 |
| 4.3.3 诱导培养基的筛选 |
| 4.3.4 分化培养基的筛选 |
| 4.3.5 不同培养基对橡胶草生根的影响 |
| 4.4 本章小结 |
| 5 橡胶草种质资源离体保存技术 |
| 5.1 引言 |
| 5.2 材料与方法 |
| 5.2.1 试验材料 |
| 5.2.2 试验方法 |
| 5.3 结果与分析 |
| 5.3.1 培养基养分水平对橡胶草试管苗离体保存的影响 |
| 5.3.2 渗透性调节化合物对橡胶草试管苗保存的影响 |
| 5.3.3 生长抑制剂对橡胶草试管苗离体保存的影响 |
| 5.4 本章小结 |
| 6 灌溉频率对橡胶草生长和产量的影响 |
| 6.1 引言 |
| 6.2 试验设计与方法 |
| 6.2.1 试验设计 |
| 6.2.2 研究方法 |
| 6.2.3 数据处理与分析 |
| 6.3 结果与分析 |
| 6.3.1 土壤含水量变化情况 |
| 6.3.2 灌溉频率对橡胶草地上部位的影响 |
| 6.3.3 灌溉频度对橡胶草地下部位的影响 |
| 6.3.4 灌溉频率对根叶比的影响 |
| 6.3.5 灌溉频率对橡胶草产量及其构成因子影响的趋势分析 |
| 6.3.6 水分利用效率 |
| 6.4 讨论 |
| 6.5 本章小结 |
| 7 氮磷钾基肥对橡胶草生长和产量的影响 |
| 7.1 引言 |
| 7.2 试验设计与研究方法 |
| 7.2.1 试验设计 |
| 7.2.2 整地与定植 |
| 7.2.3 测定指标 |
| 7.2.4 数据处理与分析 |
| 7.3 结果与分析 |
| 7.3.1 氮基肥对橡胶草生长的动态影响 |
| 7.3.2 磷基肥对橡胶草生长的动态影响 |
| 7.3.3 钾基肥对橡胶草生长的动态影响 |
| 7.3.4 氮基肥对橡胶草产量及其构成因子影响的趋势分析 |
| 7.3.5 磷基肥对橡胶草产量及其构成因子影响的趋势分析 |
| 7.3.6 钾基肥对橡胶草产量及其构成因子影响的趋势分析 |
| 7.4 讨论 |
| 7.5 本章小结 |
| 8 栽培密度对橡胶草生长和产量的影响 |
| 8.1 引言 |
| 8.2 材料与方法 |
| 8.2.1 研究材料 |
| 8.2.2 试验设计 |
| 8.2.3 整地与定植 |
| 8.2.4 指标测定 |
| 8.2.5 数据处理与分析 |
| 8.3 结果与分析 |
| 8.3.1 栽培密度对橡胶草地上部位的影响 |
| 8.3.2 栽培密度对橡胶草地下部位的影响 |
| 8.3.3 栽培密度对橡胶草根叶比的影响 |
| 8.3.4 栽培密度对橡胶草产量及其构成因子影响的趋势分析 |
| 8.4 讨论 |
| 8.5 本章小结 |
| 9 土壤pH对橡胶草生长和产量的影响 |
| 9.1 引言 |
| 9.2 材料与方法 |
| 9.2.1 研究材料 |
| 9.2.2 试验设计 |
| 9.2.3 整地与定植 |
| 9.2.4 指标测定 |
| 9.2.5 数据处理与分析 |
| 9.3 结果与分析 |
| 9.3.1 土壤pH对橡胶草地上部分的影响 |
| 9.3.2 土壤pH对橡胶草地下部分的影响 |
| 9.3.3 土壤pH对橡胶草根叶比的影响 |
| 9.3.4 土壤pH对橡胶草产量及其构成因子影响的趋势分析 |
| 9.4 讨论 |
| 9.5 本章小结 |
| 10 橡胶草生物量无损估计与栽培技术优化 |
| 10.1 引言 |
| 10.2 研究方法 |
| 10.2.1 叶片生物量估计模型建立方法 |
| 10.2.2 根生物量估计模型建立方法 |
| 10.2.3 栽培技术优化模型建立方法 |
| 10.2.4 数据处理与作图使用的软件包 |
| 10.3 结果与分析 |
| 10.3.1 橡胶草叶片生物量估计模型 |
| 10.3.2 橡胶草根生物量估计模型 |
| 10.3.3 橡胶草栽培技术优化模型 |
| 10.4 本章小结 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 附录1: 橡胶含量测定红外光谱图 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
| 博士学位论文修改情况确认表 |
（2）梨试管苗种质资源保存的研究（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 1.2.1 试管苗最佳保存培养基的筛选 |
| 1.2.2 10份梨种质资源生长状态的观察 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 试管苗最佳保存培养基的筛选 |
| 2.2 10份梨种质资源生长状态的观察 |
| 3 小结与讨论 |
| 3.1 PP333与甘露醇浓度对黄花梨试管苗离体保存的影响 |
| 3.2 PP333与甘露醇在试管苗离体保存中的应用 |
| 3.3 梨种质资源保存的意义 |
（3）金钻蔓绿绒组培苗离体保存技术研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 缩略词表 |
| 第一章 文献综述 |
| 1.1 金钻蔓绿绒组培苗研究进展 |
| 1.2 植物组织培养概念及其分化过程 |
| 1.3 组织培养的微环境及其特征 |
| 1.4 国内外组培苗微环境调控的研究进展和发展趋势 |
| 1.5 植物组织培养限制生长离体保存影响因子研究进展 |
| 1.6 组培苗驯化移栽 |
| 1.7 研究目的及意义 |
| 1.8 主要研究内容 |
| 1.9 技术路线图 |
| 第二章 金钻蔓绿绒组培苗缓慢生长离体保存技术研究 |
| 2.1 试验材料与方法 |
| 2.2 数据处理与分析 |
| 2.3 金钻蔓绿绒组培苗植物学性状的观察与生长情况统计方法 |
| 2.4 试验结果与分析 |
| 第三章 金钻蔓绿绒组培苗启动生长及驯化移栽试验 |
| 3.1 试验材料与试验方法 |
| 3.2 数据的测定 |
| 3.3 数据处理及分析 |
| 3.4 试验结果与分析 |
| 3.5 小结 |
| 第四章 讨论与结论 |
| 4.1 讨论 |
| 4.2 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 个人简介 |
（4）菊花低温离体缓慢生长保存技术研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 引言 |
| 第一章 文献综述 |
| 1 问题的提出 |
| 1.1 植物种植资源保存的意义 |
| 1.2 植物种植资源离体保存的必要性 |
| 2 前人研究进展 |
| 2.1 植物种质资源缓慢生长离体保存研究进展 |
| 2.1.1 降低培养温度 |
| 2.1.2 调节培养光照 |
| 2.1.3 改变氧气含量 |
| 2.1.4 提高培养基渗透压 |
| 2.1.5 添加生长抑制物质 |
| 2.1.6 调节培养基成分 |
| 2.1.7 适合的容器和保存材料、封口材料 |
| 2.1.8 综合技术应用 |
| 2.2 遗传稳定性检测 |
| 3 本研究的目的意义 |
| 第二章 不同品种菊花试管苗低温下生长差异分析 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试验材料 |
| 1.2 试验方法 |
| 1.2.1 离体保存 |
| 2 结果分析 |
| 2.1 菊花试管苗低温下株高和叶片数变异分析 |
| 2.2 菊花试管苗低温下株高和叶片数正态分布分析 |
| 2.3 菊花试管苗低温下枯叶率聚类分析 |
| 2.4 菊花试管苗低温下株高和叶片数等性状相关性分析 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 第三章 甘露醇和蔗糖对菊花低温离体保存的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试验材料 |
| 1.2 试验方法 |
| 1.2.1 生长状况比较 |
| 1.2.2 离体保存 |
| 1.2.3 组织学观察 |
| 1.2.4 恢复生长 |
| 1.2.5 遗传稳定性鉴定 |
| 1.2.6 多品种验证 |
| 2 结果分析 |
| 2.1 4个菊花品种生长状况差异比较 |
| 2.2 甘露醇对菊花低温离体保存的影响 |
| 2.2.1 甘露醇对菊花低温离体保存存活率的影响 |
| 2.2.2 甘露醇对菊花低温离体保存株高的影响 |
| 2.2.3 甘露醇对菊花低温离体保存绿叶数的影响 |
| 2.3 蔗糖对菊花低温离体保存的影响 |
| 2.3.1 蔗糖对菊花低温离体保存存活率的影响 |
| 2.3.2 蔗糖对菊花低温离体保存株高的影响 |
| 2.3.3 蔗糖对菊花低温离体保存绿叶数的影响 |
| 2.4 组织学观察 |
| 2.5 恢复生长和遗传稳定性鉴定 |
| 2.6 品种验证 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 第四章 甘露醇和蔗糖复合处理对菊花低温离体保存的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试验材料 |
| 1.2 试验方法 |
| 1.2.1 离体保存 |
| 1.2.2 组织学观察 |
| 1.2.3 恢复生长 |
| 1.2.4 遗传稳定性检测 |
| 2 结果分析 |
| 2.1 蔗糖和甘露醇复合处理对菊花低温离体保存存活率的影响 |
| 2.2 蔗糖和甘露醇复合处理对菊花低温离体保存株高和枯叶率的影响 |
| 2.2.1 蔗糖和甘露醇复合处理对菊花低温离体保存株高的影响 |
| 2.2.2 甘露醇和蔗糖复合处理对菊花低温离体保存枯叶率的影响 |
| 2.3 组织学观察 |
| 2.4 恢复生长 |
| 2.5 遗传稳定性鉴定 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 全文总结 |
| 参考文献 |
| 攻读硕士期间发表的学术论文 |
| 致谢 |
（5）若干种枇杷属植物的超低温保存（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 主要缩略词表 |
| 1 研究背景 |
| 1.1 枇杷属植物种质资源简介 |
| 1.2 超低温保存简介 |
| 1.3 植物种质资源的超低温保存方法 |
| 1.3.1 降温速率法 |
| 1.3.2 玻璃化法 |
| 1.4 超低温保存的关键因素 |
| 1.4.1 玻璃化液装载 |
| 1.4.2 玻璃化转变温度 |
| 1.4.3 预培养 |
| 1.4.4 外植体 |
| 1.4.5 恢复生长 |
| 1.5 枇杷超低温保存研究进展 |
| 1.6 研究目的和意义 |
| 2 枇杷属植物离体培养和茎尖快速扩繁体系的建立 |
| 2.1 前言 |
| 2.2 材料与试剂 |
| 2.3 实验方法 |
| 2.4 结果与分析 |
| 2.4.1 枇杷属植物不同种的胚离体培养差异性研究 |
| 2.4.2 不同细胞分裂素对台×解茎尖离体培养的影响 |
| 2.4.3 若干种枇杷属植物的茎尖快繁效率比较 |
| 2.5 讨论 |
| 3 氧化三甲胺对超低温保存的影响 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.1.1 材料 |
| 3.1.2 超低温保护剂和再生培养基的配制 |
| 3.1.3 超低温保护液的装载时间优化和超低温降温程序设置 |
| 3.1.4 恢复培养和恢复情况统计 |
| 3.2 实验结果 |
| 3.2.1 TMAO与DMSO对枇杷属植物茎尖超低温保存的影响 |
| 3.2.2 不同TMAO装载时间对枇杷属植物茎尖超低温保存的影响 |
| 3.3 讨论 |
| 4 若干种枇杷属植物的超低温保存 |
| 4.1 材料与方法 |
| 4.1.1 材料 |
| 4.1.2 试剂的配制 |
| 4.1.3 超低温保存的基本步骤 |
| 4.1.4 玻璃化转变温度前后降温速率优化 |
| 4.1.5 外植体长度对枇杷属植物超低温保存的影响 |
| 4.1.6 若干枇杷属植物的超低温保存 |
| 4.2 实验结果 |
| 4.2.1 玻璃化转变温度前后的降温速率优化 |
| 4.2.2 外植体长度对超低温保存的影响 |
| 4.2.3 几种枇杷属植物的超低温保存 |
| 4.3 分析与讨论 |
| 4.3.1 玻璃化转变温度前后降温速率 |
| 4.3.2 外植体大小 |
| 4.3.3 若干种枇杷属植物种质的超低温保存 |
| 5 主要结论 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 附录 |
（6）枇杷属植物野生种的常温离体保存研究（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 栎叶枇杷的离体保存 |
| 2.1.1 温度和光照的影响 |
| 2.1.2 蔗糖浓度及不同植物生长调节剂的影响 |
| 2.1.3 KT和AC的影响 |
| 2.1.4 愈伤组织和生根的影响 |
| 2.2 枇杷属多种植物离体培养保存 |
| 3 结论与讨论 |
（7）木薯种质资源离体保存技术研究（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试验材料 |
| 1.2 木薯无菌苗的诱导 |
| 1.3 木薯组培苗的离体保存 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 不同生长抑制剂对木薯试管苗保存180 d形态指标的影响 |
| 2.2 PP333对木薯试管苗保存的影响 |
| 2.3 B9对木薯试管苗保存的影响 |
| 2.4 S3307 对木薯试管苗保存的影响 |
| 2.5 ABA对木薯试管苗保存的影响 |
| 3 小结与讨论 |
（8）红香芋离体保存技术的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 缩略词表 |
| 引言 |
| 第一章 文献综述 |
| 1 芋概述 |
| 2 植物种质资源保存 |
| 2.1 植物种质资源 |
| 2.2 保存方式 |
| 2.3 离体保存方法 |
| 3 芋种质资源保存研究进展 |
| 3.1 芋种质资源常规保存方法 |
| 3.2 芋种质资源离体保存研究进展 |
| 第二章 利用缓慢生长法保存红香芋试管苗的研究 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 植物材料及其培养 |
| 1.2 试验设计及处理 |
| 1.3 测定指标和方法 |
| 1.4 数据处理与统计分析 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 不同化学药剂及浓度对红香芋试管苗长期保存的影响 |
| 2.2 缓慢生长法保存的红香芋试管苗恢复生长后形态及生理指标的变化 |
| 3 讨论 |
| 第三章 红香芋茎尖玻璃化法超低温保存技术研究 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 植物材料及其培养 |
| 1.2 试验设计及处理 |
| 1.3 测定指标和方法 |
| 1.4 数据处理与统计分析 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 蔗糖预培养对芋茎尖含水量、可溶性糖含量和冻存后茎尖存活率的影响 |
| 2.2 玻璃化保护液对芋茎尖含水量与冻存后存活率的影响 |
| 2.3 化冻温度与时间对芋茎尖冻存后存活率的影响 |
| 2.4 冻存后红香芋茎尖再生培养 |
| 3 讨论 |
| 第四章 蔗糖和KNO_3及水杨酸浓度对红香芋试管球茎诱导的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 植物材料及其培养 |
| 1.2 试验设计和处理 |
| 1.3 测定指标 |
| 1.4 数据处理与统计分析 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 蔗糖浓度对试管球茎形成的影响 |
| 2.2 KNO_3浓度对试管球茎形成的影响 |
| 2.3 水杨酸浓度对试管球茎形成的影响 |
| 3 讨论 |
| 第五章 红香芋试管球茎膨大过程中主要碳水化合物含量变化的研究 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 植物材料及其培养 |
| 1.2 试验设计和处理 |
| 1.3 测定指标和方法 |
| 1.4 数据处理与统计分析 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 试管球茎形成过程中可溶性糖含量的变化 |
| 2.2 红香芋试管球茎总淀粉、直链淀粉、支链淀粉含量的变化 |
| 2.3 红香芋试管球茎ADPG焦磷酸化酶和淀粉分支酶活性的变化 |
| 2.4 红香芋试管球茎淀粉粒的显微观察 |
| 3 讨论 |
| 参考文献 |
| 全文结论 |
| 攻读硕士期间发表的论文 |
| 致谢 |
（9）尤溪金柑等柑橘类种质离体保存及其Fc-MLP2基因克隆与表达（论文提纲范文）
| 缩写词 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 第一章 引言 |
| 1 植物种质资源离体保存研究进展 |
| 1.1 植物种质资源的缓慢生长保存 |
| 1.1.1 降低保存环境温度 |
| 1.1.2 调节培养环境光照条件 |
| 1.1.3 调节培养基渗透压和添加生长调节剂 |
| 1.1.4 调整培养环境的气相条件 |
| 1.1.5 调整培养基组分 |
| 1.1.6 其他方法 |
| 1.2 植物种质资源的超低温保存 |
| 1.3 植物种质资源离体保存存在问题 |
| 2 柑橘类植物种质资源离体保存研究进展 |
| 2.1 组织培养法保存 |
| 2.1.1 试管苗保存 |
| 2.1.2 愈伤组织的保存 |
| 2.2 超低温保存 |
| 2.3 柑橘类植物试管苗再生体系研究 |
| 3 植物 MLP2 基因的研究进展 |
| 3.1 MLP 结构与功能 |
| 3.2 MLP2 基因克隆与表达研究 |
| 4 植物基因转化烟草的研究 |
| 5 本研究的目的意义和主要研究内容 |
| 5.1 本研究的意义 |
| 5.2 本研究的主要内容 |
| 第二章 尤溪金柑再生体系的建立与优化 |
| 1 试验材料和方法 |
| 1.1 试验材料 |
| 1.2 试验方法 |
| 1.2.1 无菌体系建立 |
| 1.2.2 KT 对尤溪金柑试管苗增殖的影响 |
| 1.2.3 NAA 和 KT 对芽增殖的影响 |
| 1.2.4 BA 和 NAA 对芽增殖的影响 |
| 1.2.5 NAA 和 IBA 对试管苗生根的影响 |
| 1.3 数据处理与分析 |
| 2 结果分析 |
| 2.1 KT 对尤溪金柑芽增殖的影响 |
| 2.2 NAA 和 KT 对尤溪金柑芽增殖的影响 |
| 2.3 BA 和 NAA 对尤溪金柑芽增殖的影响 |
| 2.4 不同处理对尤溪金柑生根的影响 |
| 2.4.1 不同处理对尤溪金柑生根率的影响 |
| 2.4.2 不同处理对尤溪金柑生根数的影响 |
| 3 讨论 |
| 第三章 尤溪金柑等柑橘类植物种质资源的离体保存研究 |
| 第一节 尤溪金柑种质资源离体保存条件的探讨与优化 |
| 1 材料方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 1.2.1 不同容器对尤溪金柑离体种质保存的影响 |
| 1.2.2 培养基中 CaCl_2浓度对尤溪金柑离体种质保存的影响 |
| 1.2.3 不同处理对尤溪金柑离体种质保存的影响 |
| 2 结果分析 |
| 2.1 不同容器对尤溪金柑试管苗缓慢生长保存的影响 |
| 2.2 CaCl_2对尤溪金柑试管苗缓慢生长保存的影响 |
| 2.3 CaCl_2、甘露醇和 PP333对尤溪金柑试管苗缓慢生长保存的影响 |
| 2.3.1 保存 6 个月后存活率 |
| 2.3.2 保存 12 个月后存活率 |
| 3 讨论 |
| 3.1 低浓度的 CaCl_2和小容积的培养容器有利于尤溪金柑试管苗的中长期保存 |
| 3.2 培养基中添加适当浓度的 CaCl_2和 PP333可提高尤溪金柑试管苗存活率 |
| 第二节 92 份柑橘种质资源试管苗离体保存与生长状态观察 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果分析 |
| 2.1 原有的 67 份柑橘种质资源生长状态观察 |
| 2.2 25 份新收集柑橘种质资源 |
| 2.3 25 份柑橘种质资源的观察 |
| 3 讨论 |
| 3.1 不同基因型的柑橘种质资源试管苗生长状态不同 |
| 3.2 试管苗离体保存柑橘种质资源优势明显 |
| 第四章 尤溪金柑试管苗 Fc-MLP2 基因的克隆 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 尤溪金柑 Fc-MLP2 基因保守区的克隆 |
| 1.3 尤溪金柑 Fc-MLP2 基因 3’RACE |
| 1.4 尤溪金柑 Fc-MLP2 基因 5’RACE |
| 1.5 尤溪金柑 Fc-MLP2 基因全长的拼接及 ORF 验证 |
| 1.6 尤溪金柑 Fc-MLP2 生物信息学分析 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 尤溪金柑试管苗叶片总 RNA 的提取 |
| 2.2 尤溪金柑 Fc-MLP2 基因全长的克隆 |
| 2.2.1 尤溪金柑 Fc-MLP2 基因保守区克隆 |
| 2.2.2 尤溪金柑 Fc-MLP2 基因 3′RACE |
| 2.2.3 尤溪金柑 Fc-MLP2 基因 5′RACE |
| 2.2.4 尤溪金柑 Fc-MLP2 基因全长拼接与 ORF 验证 |
| 2.3 尤溪金柑 Fc-MLP2 序列的生物信息学分析 |
| 2.3.1 尤溪金柑 Fc-MLP2 序列理化性质及亲疏水性预测分析 |
| 2.3.2 尤溪金柑 Fc-MLP2 的信号肽和亚细胞定位预测分析 |
| 2.3.3 尤溪金柑 Fc-MLP2 跨膜结构预测分析 |
| 2.3.4 尤溪金柑 Fc-MLP2 磷酸化位点、功能位点和保守结构域的预测分析 |
| 2.3.5 尤溪金柑 Fc-MLP2 二级结构、三级结构和卷曲螺旋的预测分析 |
| 2.3.6 尤溪金柑 Fc-MLP2 氨基酸序列分析及系统进化树的构建 |
| 3 讨论 |
| 第五章 Fc-MLP2 基因的荧光定量 PCR 分析 |
| 1 材料和方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 试剂与仪器 |
| 1.3 方法 |
| 1.3.1 尤溪金柑不同保存时期试管苗材料的获得 |
| 1.3.2 总 RNA 的提取及质量鉴定 |
| 1.3.3 cDNA 合成 |
| 1.3.4 Fc-MLP2 基因的实时荧光定量 PCR |
| 2 结果分析 |
| 2.1 尤溪金柑不同保存时期材料的总 RNA 的提取及质量鉴定 |
| 2.2 标准曲线建立 |
| 2.3 内参基因 18S rRNA 和目的基因 Fc-MLP2 的特异性扩增 |
| 2.4 尤溪金柑不同保存时期 Fc-MLP2 基因的相对定量表达分析 |
| 3 讨论 |
| 3.1 Fc-MLP2 基因与尤溪金柑保存状态有关 |
| 3.2 Fc-MLP2 基因在尤溪金柑保存中的作用 |
| 第六章 Fc-MLP2 基因转化烟草与功能鉴定研究 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.1.1 植物材料及所用菌株和质粒 |
| 1.1.2 培养基 |
| 1.1.3 试剂 |
| 1.1.4 PCR 引物 |
| 1.2 方法 |
| 1.2.1 载体构建及农杆菌的培养 |
| 1.2.2 根癌农杆菌转化烟草叶片 |
| 1.2.3 转基因植株的检测 |
| 1.2.4 低温对转基因烟草 Fc-MLP2 基因表达的影响 |
| 1.2.5 机械损伤对转基因烟草 Fc-MLP2 基因表达的影响 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 载体构建及重组子鉴定 |
| 2.2 转基因植株检测 |
| 2.2.1 转基因植株的 DNA 水平检测 |
| 2.2.2 转基因植株的 GUS 检测 |
| 2.2.3 RNA 转录水平检测 |
| 2.3 转基因烟草定量表达分析 |
| 2.3.1 标准曲线建立 |
| 2.3.2 低温对转基因烟草 Fc-MLP2 基因表达的影响 |
| 2.3.3 机械损伤对转基因烟草 Fc-MLP2 基因表达的影响 |
| 3 讨论 |
| 3.1 pCAMBIA1301- Fc-MLP2 载体的优点 |
| 3.2 低温处理下转基因烟草中 Fc-MLP2 基因的相对表达量降低 |
| 3.3 Fc-MLP2 基因在植物抵御机械伤害上有一定作用 |
| 第七章 小结 |
| 1 尤溪金柑再生体系建立及优化 |
| 2 尤溪金柑等柑橘类植物种质资源保存 |
| 2.1 尤溪金柑种质资源离体保存条件的探讨与优化 |
| 2.2 25 份柑橘种质资源保存体系建立与生长状态观察 |
| 3 Fc-MLP2 基因的克隆与生物信息学分析 |
| 4 尤溪金柑种质资源保存过程中 Fc-MLP2 基因的定量表达 |
| 5 Fc-MLP2 基因转化烟草的研究 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
（10）枇杷种质限制生长保存及乙烯代谢与信号转导相关基因等克隆及表达（论文提纲范文）
| 缩写词 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 第一章 引言 |
| 1 植物种质资源离体保存研究进展 |
| 1.1 植物离体保存的优缺点 |
| 1.2 植物离体保存方法 |
| 1.2.1 限制生长保存 |
| 1.2.2 低温保存 |
| 1.2.3 超低温保存 |
| 2 植物乙烯代谢与信号转导 |
| 2.1 乙烯代谢 |
| 2.2 ACS 和 ACO 基因研究 |
| 2.3 乙烯受体基因 ETR 和 ERS |
| 3 植物 CAT 基因研究进展 |
| 3.1 CAT 基因的结构与功能 |
| 3.2 CAT 基因的克隆与表达 |
| 4 枇杷生物技术研究进展 |
| 4.1 枇杷离体培养研究进展 |
| 4.1.1 胚培养 |
| 4.1.2 茎尖培养 |
| 4.1.3 花药培养 |
| 4.1.4 原生质体培养 |
| 4.1.5 胚乳培养 |
| 4.2 枇杷种质资源离体保存研究进展 |
| 4.3 枇杷基因克隆研究进展 |
| 5 本研究的研究意义和内容 |
| 5.1 本研究的意义 |
| 5.2 本研究的主要内容 |
| 第二章 枇杷离体培养 |
| 第一节 枇杷胚培养与试管苗的获得 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试验材料 |
| 1.2 试验方法 |
| 1.2.1 枇杷幼果的处理 |
| 1.2.2 枇杷胚萌发 |
| 1.3 培养条件 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 GA3对枇杷幼胚萌发率的影响 |
| 2.2 光质对枇杷幼胚萌发率的影响 |
| 2.3 不同生长调节剂对枇杷成熟胚萌发的影响 |
| 3 讨论 |
| 3.1 GA3有利于枇杷幼胚的萌发 |
| 3.2 红光能够促进幼胚萌发 |
| 第二节 枇杷试管苗增殖培养与生根培养 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 1.2.1 枇杷试管苗的增殖培养 |
| 1.2.2 试管苗的生根培养 |
| 1.3 培养条件 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 TDZ 对试管苗增殖的影响 |
| 2.2 KT 对枇杷试管苗增殖的影响 |
| 2.3 枇杷试管苗的生根 |
| 3 讨论 |
| 3.1 适当浓度的 TDZ 或 KT 有利于枇杷试管苗的增殖 |
| 3.2 枇杷试管苗生根培养中激素的作用 |
| 第三章 枇杷试管苗离体保存研究 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 1.2.1 21 份枇杷资源在同一培养基离体保存的时间差异 |
| 1.2.2 不同光质条件对枇杷试管苗离体保存的影响 |
| 1.3 培养条件 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 21 份枇杷资源在同一培养基离体保存的时间差异 |
| 2.2 不同光质条件对枇杷试管苗离体保存的影响 |
| 3 讨论 |
| 3.1 不同基因型枇杷试管苗的保存时间存在差异 |
| 3.2 红光有利于枇杷试管苗保存 |
| 第四章 枇杷乙烯代谢与信号转导相关基因克隆与生物信息学分析 |
| 第一节 枇杷 ETR 基因克隆及生物信息学分析 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.1.1 试验材料 |
| 1.1.2 试剂 |
| 1.2 方法 |
| 1.2.1 总 RNA 的提取和检测 |
| 1.2.2 cDNA 第一链合成及 5’RACE cDNA 合成 |
| 1.2.3 引物设计与合成 |
| 1.2.4 目的片段的扩增 |
| 1.2.5 目的片段的回收、连接转化及序列测定 |
| 1.2.6 生物信息学分析 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 枇杷试管苗总 RNA 的提取 |
| 2.2 枇杷 ETR 基因 cDNA 保守区的克隆 |
| 2.3 枇杷 ETR 基因 3’RACE 扩增 |
| 2.4 枇杷 ETR 基因 5’末端的获得 |
| 2.5 枇杷 ETR 基因全长序列 ORF 及分析 |
| 2.6 枇杷 ETR 不同成员的生物信息学分析 |
| 2.6.1 蛋白质理化性质的预测与分析 |
| 2.6.2 蛋白质亲疏水特性预测 |
| 2.6.3 蛋白质磷酸化位点预测 |
| 2.6.4 蛋白质跨膜结构预测与分析 |
| 2.6.5 蛋白质信号肽预测与分析 |
| 2.6.6 蛋白质卷曲螺旋结构的预测与分析 |
| 2.6.7 蛋白质功能位点预测和分析 |
| 2.6.8 蛋白质亚细胞定位 |
| 2.6.9 蛋白质二级结构预测与分析 |
| 2.6.10 蛋白质三级结构预测 |
| 2.6.11 蛋白质家族及保守结构域分析 |
| 2.6.12 蛋白质系统进化树的构建与分析 |
| 3 讨论 |
| 3.1 枇杷总 RNA 提取的技术关键 |
| 3.2 Ej-ETR1a、Ej-ETR2a 预测结果符合已报道 ETR1 结构和功能 |
| 3.3 枇杷 ETR 蛋白的功能多样性 |
| 第二节 枇杷 ERS 基因的克隆与生物信息学分析 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 1.2.1 总 RNA 的提取和检测 |
| 1.2.2 cDNA 第一链合成和 5’RACE cDNA 的合成 |
| 1.2.3 引物设计与合成 |
| 1.2.4 目的片段的扩增 |
| 1.2.5 目的片段的回收、连接转化及序列测定 |
| 1.2.6 生物信息学分析 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 枇杷 ERS 基因 cDNA 全长的克隆 |
| 2.2 枇杷 ERS 基因 ORF 分析 |
| 2.3 枇杷 ERS 基因生物信息学分析 |
| 2.3.1 Ej-ERS 蛋白理化性质预测 |
| 2.3.2 Ej-ERS 蛋白亲疏水特性预测与分析 |
| 2.3.3 Ej-ERS 蛋白跨膜结构预测 |
| 2.3.4 蛋白质磷酸化位点预测 |
| 2.3.5 蛋白质卷曲螺旋结构的预测 |
| 2.3.6 蛋白质信号肽的预测 |
| 2.3.7 蛋白质功能位点的预测 |
| 2.3.8 蛋白质亚细胞定位 |
| 2.3.9 蛋白质二级结构的预测 |
| 2.3.10 蛋白质三级结构的预测 |
| 2.3.11 蛋白质家族及保守结构域的预测与分析 |
| 2.3.12 氨基酸分子进化树的构建 |
| 3 讨论 |
| 3.1 Ej-ERS 的结构与功能 |
| 3.2 Ej-ERS 蛋白可能的蛋白质翻译后修饰方式 |
| 第五章 枇杷 CAT 基因克隆及生物信息学分析 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 1.2.1 cDNA 第一链合成和 5’RACE cDNA 的合成 |
| 1.2.2 引物的设计及合成 |
| 1.2.3 目的片段的扩增 |
| 1.2.4 目的片段的回收、连接转化及序列测定 |
| 1.2.5 生物信息学分析 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 枇杷 CAT 基因保守区的克隆 |
| 2.2 枇杷 CAT 基因 3’RACE |
| 2.3 枇杷 CAT 基因 5’端扩增 |
| 2.4 枇杷 CAT 基因 ORF 验证及分析 |
| 2.5 枇杷 CAT 生物信息学分析 |
| 2.5.1 枇杷 CAT 蛋白理化性质预测 |
| 2.5.2 蛋白亲疏水性预测与分析 |
| 2.5.3 蛋白质跨膜结构预测 |
| 2.5.4 蛋白质亚细胞定位预测 |
| 2.5.5 蛋白质卷曲螺旋结构预测 |
| 2.5.6 蛋白质功能位点预测 |
| 2.6.7 蛋白质磷酸化位点预测 |
| 2.6.8 蛋白质信号肽预测 |
| 2.6.9 蛋白质二级结构预测 |
| 2.6.10 蛋白质三级结构预测 |
| 2.6.11 蛋白质家族与保守结构域预测与分析 |
| 2.6.12 氨基酸分子进化树的构建 |
| 3 讨论 |
| 3.1 枇杷 CAT 在试管苗离体保存中可能的作用机理 |
| 3.2 枇杷 CAT 蛋白质的可能翻译后修饰方式 |
| 3.3 枇杷 CAT2 基因 3’UTR 的多态性调控 |
| 第六章 枇杷试管苗离体保存过程中乙烯代谢与信号转导相关基因等表达分析 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试验材料 |
| 1.2 试验方法 |
| 1.2.1 枇杷叶片总 RNA 的提取及 cDNA 的合成 |
| 1.2.2 引物设计 |
| 1.2.3 Real Time PCR 反应 |
| 1.2.4 标准曲线的制作 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 枇杷叶片不同时期总 RNA 提取 |
| 2.2 各目的基因 qPCR 引物特异性及扩增效率分析 |
| 2.3 枇杷试管苗离体保存过程中 ACS 基因的相对定量表达分析 |
| 2.4 枇杷试管苗离体保存过程中 ACO 基因的相对定量表达分析 |
| 2.5 枇杷试管苗离体保存过程中 ETR 基因的相对定量表达分析 |
| 2.6 枇杷试管苗离体保存过程中 ERS 基因的相对定量表达分析 |
| 2.7 枇杷试管苗离体保存过程中 CAT 基因的相对定量表达分析 |
| 3 讨论 |
| 3.1 枇杷试管苗离体保存过程中的 ACS、ACO 基因表达量变化的相互联系 |
| 3.2 枇杷试管苗离体保存过程中 ETR、ERS 表达量具有类似的变化规律 |
| 3.3 枇杷 CAT 基因在试管苗离体保存中的作用 |
| 第七章 小结 |
| 1 枇杷胚培养及试管苗的获得 |
| 2 枇杷试管苗的增殖培养和生根培养 |
| 3 21 份枇杷种质资源试管苗的离体保存研究 |
| 4 枇杷试管苗叶片乙烯受体 ETR 基因的克隆 |
| 5 枇杷试管苗叶片乙烯受体 ERS 基因的克隆 |
| 6 枇杷试管苗叶片 CAT 基因的克隆 |
| 7 枇杷试管苗离体保存过程中乙烯代谢与信号转导相关基因等表达的 qPCR 分析 |
| 参考文献 |
| 附录 1 图版及图版说明 |
| 附录 2 枇杷 Ej-ETR1a 基因（cDNA）序列登录 GenBank 信息 |
| 附录 3 枇杷 Ej-ETR1b 基因（cDNA）序列登录 GenBank 信息 |
| 附录 4 枇杷 Ej-ETR1c 基因（cDNA）序列登录 GenBank 信息 |
| 附录 5 枇杷 Ej-ETR2a 基因（cDNA）序列登录 GenBank 信息 |
| 附录 6 枇杷 Ej-ETR2b 基因（cDNA）序列登录 GenBank 信息 |
| 附录 7 枇杷 Ej-ETR2c 基因（cDNA）序列登录 GenBank 信息 |
| 附录 8 枇杷 Ej-ETR2d 基因（cDNA）序列登录 GenBank 信息 |
| 附录 9 枇杷 Ej-ERS 基因（cDNA）序列登录 GenBank 信息 |
| 附录 10 枇杷 Ej-CAT1 基因（cDNA）序列登录 GenBank 信息 |
| 附录 11 枇杷 Ej-CAT2 基因（cDNA）序列登录 GenBank 信息 |
| 附录 12 枇杷 Ej-CAT2-2 基因（cDNA）序列登录 GenBank 信息 |
| 附录 13 枇杷 Ej-CAT 2-3 基因（cDNA）序列登录 GenBank 信息 |
| 附录 14 枇杷 Ej-CAT 2-4 基因（cDNA）序列登录 GenBank 信息 |
| 附录 15 枇杷 Ej-CAT 2-5 基因（cDNA）序列登录 GenBank 信息 |
| 附录 16 枇杷离体保存过程中乙烯代谢与信号转导相关基因等 qPCR 分析相关曲线图版 |
| 攻读硕士学位期间发表论文情况与参加学术会议情况 |
| 致谢 |
四、枇杷种质资源的离体保存研究Ⅱ生长抑制剂的影响（论文参考文献）
- [1]橡胶草高效繁育、栽培技术与管理优化研究[D]. 沈光. 东北林业大学, 2021
- [2]梨试管苗种质资源保存的研究[J]. 汤燕姗. 东南园艺, 2020(04)
- [3]金钻蔓绿绒组培苗离体保存技术研究[D]. 徐盼盼. 宁夏大学, 2020(03)
- [4]菊花低温离体缓慢生长保存技术研究[D]. 王小乐. 南京农业大学, 2018(07)
- [5]若干种枇杷属植物的超低温保存[D]. 黄天启. 华南农业大学, 2018(08)
- [6]枇杷属植物野生种的常温离体保存研究[J]. 刘义存,黄天启,林顺权. 中国南方果树, 2016(04)
- [7]木薯种质资源离体保存技术研究[J]. 刘连军,黎萍,李恒锐,彭靖茹,李慧敏. 湖北农业科学, 2016(08)
- [8]红香芋离体保存技术的研究[D]. 臧玉文. 南京农业大学, 2015(06)
- [9]尤溪金柑等柑橘类种质离体保存及其Fc-MLP2基因克隆与表达[D]. 金建涛. 福建农林大学, 2013(01)
- [10]枇杷种质限制生长保存及乙烯代谢与信号转导相关基因等克隆及表达[D]. 李丽秀. 福建农林大学, 2013(S2)